Реактивы, оборудование и
расходные материалы
для лабораторий
8 (800) 333-12-26 info@skygen.com
пн-пт: 9:30-18:00 по МСК

Набор EnGen® для детекции мутаций

New England Biolabs Inc.
Артикул Название товара Цена*
E3321 S Набор EnGen® для детекции мутаций (25 реакций) по запросу
*Все цены указаны с учетом НДС. Стоимость доставки рассчитывается отдельно.
Набор EnGen® для детекции мутаций

Набор предназначен для оценки эффективности целевого редактирования генома, выполненного с помощью нуклеаз Cas, TALENs, ZFN и др. Принцип анализа заключается в детекции мутаций, в основе которой лежит способность T7 эндонуклеазы I распознавать и расщеплять в двухцепочечной ДНК участки неспаренных оснований длиной более 1 н.п.

Этапы детекции мутаций с помощью набора

  1. Высокоточная амплификация с помощью ПЦР участков геномной ДНК, подвергшихся редактированию. В качестве ДНК-полимеразы в данном наборе используется Q5® Hot Start HF ДНК-полимераза, являющаяся на сегодняшний день самым точным ферментом такого типа.
  2. Денатурация и повторный отжиг друг на друге продуктов ПЦР. Поскольку в ходе редактирования участка генома в нем появляются инсерции и делеции, то на этом этапе протокола образуются гетеродуплексы, часть оснований которых не спарена.
  3. Продукты предыдущей реакции обрабатываются EnGen® T7 эндонуклеазой I. В результате фрагменты с полностью комплементарными друг другу цепями остаются интактными, а гетеродуплексы расщепляются с образованием более коротких продуктов.
  4. Анализ продуктов расщепления EnGen® T7 эндонуклеазой I c помощью гель-электрофореза или другими методами.
Детекция мутаций с помощью набора EnGen®

Протокол оптимизирован таким образом, что продукты ПЦР не нуждаются в очистке и могут сразу обрабатываться EnGen® T7 эндонуклеазой I. Расщепление гетеродуплексов занимает всего 15 минут и заканчивается добавлением Протеиназы K для остановки реакции.

В состав набора входят:

Название компонента Концентрация Температура хранения
NEB-буфер 2.1 10X -20°C
Краситель для нанесения гель, пурпурный 6X +25°C
EnGen® T7 эндонуклеаза I - -20°C
Готовая смесь для ПЦР с Q5® Hot Start HF ДНК-полимеразой 2X -20°C
Маркер Quick-Load® Plus 1 т.п.н. длин ДНК, пурпурный - +4°C
Протеиназа К высокой степени очистки 800 е.а./мл -20°C
Смесь контрольного образца и праймеров - -20°C

Материалы и приборы, которые потребуются для работы с набором:

Скачать руководство↓

С этим товаром покупают

Артикул Название товара Цена*
M0386 S Нуклеаза Cas9, S. pyogenes (90 пмоль) по запросу
E3322 S Набор EnGen® для синтеза sgРНК, S. pyogenes (20 реакций) по запросу
M0494 S Готовая смесь для ПЦР с Q5® Hot Start HF ДНК-полимеразой (2X, 100 реакций, 2 X 1,25 мл) по запросу
*Все цены указаны с учетом НДС. Стоимость доставки рассчитывается отдельно.

Мы используем файлы cookie для улучшения работы сайта. Узнать больше.

Настройки файлов cookie

Мы используем файлы cookie для улучшения работы сайта, анализа трафика и показа персонализированной рекламы. Вы можете изменить настройки в любой момент.

Категории файлов cookie:

Необходимые

Эти cookie обеспечивают базовую функциональность сайта — вход в аккаунт, безопасность, оформление заказов. Отключение невозможно.

Функциональные

Функциональные cookie используются для обеспечения работы отдельных функций сайта, а также для запоминания ряда пользовательских предпочтений (например, выбранный язык, товары в корзине), с целью улучшения качества предоставляемого сервиса.

Отключение этого типа файлов cookie может привести к тому, что некоторые сервисы или функции сайта станут недоступны или будут работать некорректно. В результате, вам может потребоваться повторно вводить определённую информацию или настраивать предпочтения при каждом посещении сайта вручную.

Аналитические

Аналитические файлы cookie, включая сторонние аналитические cookie, помогают нам понять, как вы взаимодействуете с нашим сайтом. Эти файлы не собирают информацию, позволяющую установить вашу личность. Все данные обрабатываются в агрегированной и анонимной форме.

Рекламные

Рекламные cookie, включая сторонние, используются для создания пользовательских профилей и показа рекламы, соответствующей вашим интересам и предпочтениям при просмотре сайтов.

Эти cookie позволяют персонализировать рекламные сообщения, которые вы видите, делая их более релевантными. Они также могут использоваться для ограничения количества показов одной и той же рекламы и для оценки эффективности рекламных кампаний.