На первый взгляд кажется, что проведение ПЦР крайне простая процедура. Однако, вникнув чуть подробнее, находится огромное количество неочевидных нюансов и на оптимизацию процесса может уйти много времени, сил и денег. Специалисты NEB, учитывая накопленный опыт, создали наборы, содержащие все необходимое для эффективного проведения ПЦР.
Компания SkyGen является дистрибьютором наборов для проведения ПЦР (полимеразной цепной реакции) от New England Biolabs. Наборы для проведения ПЦР содержат все необходимые реагенты для ПЦР-анализа, кроме праймеров и матрицы, так как эти компоненты являются специфичными для целей заказчика.
Наборы реагентов для ПЦР обычно включают в себя термостабильную ДНК-полимеразу, смесь дезоксинуклеотидтрифосфаты (dNTPs), реакционный буфер с ионами магния, а также очищенную безнуклеазную воду. В некоторые наборы для ПЦР также часто входят красители и другие вещества, позволяющие наносить смесь на гель для электрофореза. Такие реагенты повсеместно применяются для ПЦР-диагностики в научных и коммерческих лабораториях.
Тест-наборы для ПЦР производства New England Biolabs, представленные на нашем сайте, отличаются свойствами входящей в набор ДНК-полимеразы. Наборы реагентов для ПЦР также включают в себя оптимальный буфер, позволяющий достичь максимальной специфичности и длины ампликонов при проведении полимеразной цепной реакции с использованием входящего в набор фермента. Для выбора конкретного набора для ПЦР необходимо представлять, для каких целей предполагается использовать реагенты.
Наборы для ПЦР-теста с Taq-полимеразой являются золотым стандартом для рутинного лабораторного анализа, так как эта полимераза наиболее часто используется для ПЦР. Известным недостатком Taq-полимеразы является низкая точность амплификации, поэтому ее рекомендуется применять для целей, для которых отсутствие ошибок при амплификации не является существенным. Например, для проведения рутинных аналитических скрининговых исследований в ПЦР-диагностике наборы на основе Taq-полимеразы являются оптимальным решением.
ПЦР-наборы с полимеразой Phusion®HF способны обеспечить высокую точность амплификации и длину фрагментов за счет использования новой, полученной генно-инженерными методами ДНК-полимеразы. Phusion® High-Fidelity обладает как высокой точностью, так и процессивностью, и поэтому наборы реагентов для ПЦР с использованием этой полимеразы часто используются для клонирования при сборке плазмид и амплификации фрагментов длиной вплоть до 20 kb.
Для более специальных целей, например, для амплификации фрагментов длиной до 30 kb рекомендуется купить наборы для ПЦР с LongAmp®Taq полимеразой, а для максимальной точности амплификации подойдут наборы для ПЦР с Q5® HF полимеразой.
Реагенты для ПЦР производства New England Biolabs используются для различных целей лабораториями по всему миру. Подробнее ознакомиться с продукцией компании и купить наборы для проведения ПЦР можно на сайте.
В каждый набор входит:
А для удобства выбора обратите внимание на следующие обозначения в названиях:
HF – в продукте используются полимераза высокой точности,
Quick-Load – в буфер добавлен краситель для нанесения продуктов ПЦР на гель,
Hot start – полимераза деактивирована и станет активна только после нагревания до 70°С.