Реактивы, оборудование и
расходные материалы
для лабораторий
English version
пн-пт: 9:30-18:00 по МСК
0

#60 Обзор продукции компании ToolGen

18.10.2019

Сегодня с системой CRISPR/Cas9 знакомы все, кто занимается исследованиями в области молекулярной биологии или хотя бы читает научно-популярную литературу. Количество статей, в которых применяется эта технология, возросло в несколько тысяч раз за последние 10 лет (Рис.1).

CRISPR публикации.png

Рис.1. Гистограмма количества опубликованных статей с упоминанием “CRISPR/Cas9” в абстракте с 2005 по 2018 год. Adli, Mazhar. “The CRISPR tool kit for genome editing and beyond.” Nature Communications vol. 9,1 1911. 15 May. 2018, doi:10.1038/s41467-018-04252-2

Также области применения CRISPR/Cas9 технологии в молекулярно-биологических исследованиях уже вышли за рамки геномного редактирования, и теперь эту систему используют для направленной регуляции генов, эпигенетического редактирования, различных манипуляций с хроматином и его визуализации.

Наш новый партнер, корейская компания ToolGen, предоставляет обширное портфолио продуктов и услуг в сфере CRISPR/Cas9 технологий:

  • гидовая РНК (дизайн/синтез),
  • Cas9 (в форме белка/плазмиды) и различные модификации Cas9,
  • контроли и готовые наборы для получения генетической модификации,
  • репортерные системы,
  • генетически-модифицированные организмы под ключ.

Гидовая РНК

Гидовая РНК служит матрицей для узнавания необходимого участка геномной ДНК, а также имеет участок связывания с нуклеазой Cas9. Компания ToolGen предлагает дизайн и синтез гидовых РНК под Ваши задачи, причем можно заказать как готовую РНК, так и в виде плазмиды. 

Сas9

В портфолио ToolGen нуклеаза Cas9 представлена в двух формах: в виде очищенного белка и плазмиды.

Cas9 all.jpg

Для заказа доступны:

  • SniperCas9 – высокоспецифичная модификация Cas9,
  • никаза Cas9 – вносит однонитевой разрыв ДНК,
  • инактивированная форма Cas9 (dead Cas9, dCas9), которую можно использовать для эпигенетических модификаций,
  • меченая нуклеаза Cy3 Cas9 для визуализации доставки в ядро,
  • Cj Cas9 из организма Campylobaster jejuni, он меньше по размеру и проще проникает в клетки.

Репортерные системы

Репортерные системы от ToolGen – это плазмиды, сконструированные для проверки работы нуклеаз и их доставки в клетки. Они также позволяют отбирать и сортировать клетки с нуклеазной активностью. ToolGen предоставляет несколько вариантов плазмид с флуоресцентными белками, антибиотикрезистентностью или поверхностным белком для MACS.

Услуги по созданию генно-модифицированных организмов

ГМО.jpg

Компания ToolGen предлагает готовые решения для дальнейших исследований в виде генетически модифицированных клеточных культур, мышей, крыс и растений. Вы можете заказать любую желаемую модификацию и получить уже генетически отредактированный организм всего за 3-6 месяцев.

Использование продукции ToolGen в научно-исследовательских работах

Представляем вашему вниманию небольшую подборку исследований, в которых используется продукция компании ToolGen:

  1. Эффективные множественные геномные модификации в геноме данио-рерио, индуцированные комплексом из crРНК, tracrРНК и Cas9.

    публ.JPG

    Группа японских ученых из лаборатории биологии развития Университета Яманаси изучила особенности нарушения генов тирозиназы и spns2 в данио-рерио при помощи системы CRISPR/Cas9. Они выяснили, что нарушение работы гена тирозиназы приводит к изменению пигментации сетчатки, а нарушение работы гена spns2 приводит к дефекту миграции сердечных прогениторных клеток. Ученые продемонстрировали эффективность одновременной инъекции компонентов CRISPR/Cas9 для внесения обеих модификаций, а также показали, что введение белка Cas9 успешнее и быстрее приводит к нарушению, чем инъекция мРНК Cas9.

  2. Высокоэффективное РНК-зависимое редактирование генома клеток человека посредством доставки очищенных Cas9 рибонуклеопротеидов.

    публ2.JPG

    В данном исследовании корейские учёные с химфака Сеульского национального университета изучили доставку рибонуклеопротеидов (РНП), состоящих из очищенной рекомбинантной нуклеазы Cas9 и гидовой РНК, в различные клеточные линии человека, включая сложные для трансфекции фибробласты и плюрипотентные стволовые клетки. Они продемонстрировали, что доставка компонентов системы CRISPR/Cas9 в виде РНП приводит к меньшему количеству неспецифичных мутаций, чем при трансфекции плазмидами. Было показано, что РНП скорее приводят к разрезанию хромосомной ДНК и быстрее разрушаются клетками, что и минимизирует количество неспецифических реакций. Также доставка в форме РНП вызывает меньше стресса у клеток.

  3. Высокоэффективный knock-out генов мышей и данио-рерио при помощи РНК-зависимых эндонуклеаз.

    Высокоэффективный knock-out генов в мышах и данио-рерио при помощи РНК-зависимых эндонуклеаз.

    Корейские ученые описали нокаут генов у мышей и данио-рерио при инъекции готовых компонентов системы CRISPR/Cas9 на стадии одноклеточного эмбриона. Таким образом были получены мыши, несущие мутацию (93%) гена Prkdc, который кодирует белок, участвующий в системе репарации двуцепочечных разрывов ДНК. Такое нарушение привело к иммунодефициту у генетически модифицированных особей.

  4. Функциональная коррекция хромосомных инверсий гена фактора свертывания крови VIII при гемофилии А в ИПСК при помощи системы CRISPR/Cas9.

    Функциональное изменение хромосомных инверсий гена фактора свертывания крови VIII при гемофилии А в ИПСК при помощи системы CRISPR/Cas9.

    Гемофилия А – генетическое заболевание, вызванное нарушением гена F8, кодирующем фактор свертывания крови VIII. Чаще всего это нарушение возникает в результате хромосомных инверсий, которые задействуют интроны гена F8. Группа исследователей из Кореи получила индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (ИПСК) от пациентов с гемофилией А и использовала систему CRISPR/Cas9 для возврата нарушенных хромосомных участков в нормальное состояние. Их результаты доказывают возможность использования системы CRISPR/Cas9 для коррекции крупных хромосомных перестроек, и раскрывают большой потенциал этого метода в терапии.

  5. Knock-out и knock-in мутации в Clamydomonas reinhardtii, полученные при помощи системы CRISPR/Cas9.

    публ5.JPG

    Альгологи столкнулись с проблемой применения системы генного редактирования CRISPR/Cas9 к некоторым водорослям, включая модельный организм - Clamydomonas reinhardtii, однако эта проблема была решена группой исследователей из Кореи. Они использовали метод доставки рибонуклеопротеидов, состоящих из гидовой РНК и Cas9 вместо плазмидной трансфекции, который показал высокую эффективность и отсутствие неспецифических реакций.

Перейти в каталог  

Обратная связь

© 2012-2019 SkyGen
Информация и цены на сайте не являются публичной офертой
На нашем веб-сайте мы используем файлы cookie, которые помогают нам создать максимально удобные для посетителя условия пользования сайтом. Если Вы продолжите использовать сайт, мы будем считать что Вас это устраивает.
ОK