#57 Рестриктазы New England Biolabs: быстрее, точнее, выгоднее

20.03.2019

Эндонуклеаза рестрикции HindIII-HF® Уже более 7 лет компания SkyGen является официальным дистрибьютором продукции New England Biolabs (NEB). И мы убеждены, что это лучший производитель эндонуклеаз рестрикции на мировом рынке.

В этом обзоре мы рассказали о главных преимуществах и достоинствах рестриктаз NEB, которые выгодно отличают их от продукции других компаний.

Каталог рестриктаз NEB →

Ассортимент и качество, которыми можно гордиться

В настоящее время ни один другой производитель в мире не может похвастаться таким же богатым ассортиментом рестриктаз, как у NEB.

Инфографика "Рестриктазы New England Biolabs"

При производстве и очистке свой продукции NEB использует только передовые технологии и подвергает ее самому строгому контролю качества (сертификаты ISO 9001, ISO 13485, ISO 14001).

Экономим время с Time-Saver™ рестриктазами

В отличие от некоторых других производителей компания NEB не стала создавать отдельную дорогостоящую линейку «быстрорежущих» ферментов. Все 35 HF® и 161 стандартная рестриктаза являются таковыми сами по себе.

Time-Saver™ эндонуклеазами рестрикции NEB называются ферменты, которые в количестве 1 мкл (0,5 мкл в случае HF®-рестриктаз) при рекомендованных условиях способны полностью разрезать 1 мкг субстрата ДНК за 15 минут и в то же время не проявляют неспецифической активности при длительной ночной инкубации.

При этом большинство из них справляется со своей работой и за 5 минут!

Все Time-Saver™ рестриктазы в нашем каталоге имеют соответствующую отметку.

Повышаем точность с High-Fidelity (HF®) рестриктазами

Сложные протоколы последовательной модификации ДНК в ходе разных процессов не всегда позволяют выполнять рестрикцию в оптимальных условиях. При этом эндонуклеазы рестрикции могут проявлять неспецифическую активность (называемую также «звездной активностью», от англ. Star Activity), расщепляя ДНК в сайтах, схожих, но не идентичных их сайтам рестрикции.

В случаях, когда такая активность может стать серьезной проблемой и привести к получению нежелательных результатов или их ошибочной интерпретации, мы рекомендуем пользоваться HF® эндонуклеазами рестрикции компании NEB.

HF® рестриктазы – это отдельная линейка аналогов стандартных эндонуклеаз рестрикции NEB, неспецифическая активность которых была существенно подавлена биоинженерными инструментами.

Говоря иными словами, это те же стандартные рестриктазы, но повышенной точности.

HF® ферменты NEB:

делают условия реакции рестрикции более гибкими,
имеют статус Time-Saver™ эндонуклеаз рестрикции,
максимально активны в одном и том же NEB-буфере CutSmart®,
поставляются с 6X пурпурным красителем для нанесения на гель,
продаются по той же цене, что и стандартные аналоги!

EcoRI-HF™ не проявляет неспецифической активности как при 5-минутной (5 мин), так и при длительной (ночь) рестрикции (СЛЕВА), а также при высоких концентрациях фермента (до 10 мкл) (СПРАВА). Реакционная смесь объемом 50 мкл содержала 1 мкг ДНК бактериофага λ. Количество фермента, время рестрикции и буфер были выбраны с учетом рекомендаций производителей. Реакционную смесь инкубировали при 37°С. М – маркер длин ДНК 1 т.п.н.

C полным списком HF® рестриктаз NEB можно ознакомиться здесь.

Система NEB-буферов: упрощаем двойную рестрикцию

Рестрицировать ДНК сразу двумя или более ферментами гораздо проще и быстрее, если все они максимально активны в одном и том же буфере.

В настоящее время система основных NEB-буферов включает в себя всего 4 наименования: NEB-буфер 1.1, NEB-буфер 2.1, NEB-буфер 3.1 и NEB-буфер CutSmart®. Все они уже имеют в своем составе БСА и не требуют его добавления.

При этом 215 рестриктаз максимально активны в одном и том же NEB-буфере CutSmart®! Также этот буфер совместим почти с 30 ферментами NEB для модификации ДНК: фосфатазами, полимеразами, нуклеазами, лигазами и др.

Ускоряем анализ продуктов рестрикции

Для ускорения анализа продуктов рестрикции компания NEB вкладывает в упаковку ста самых популярных рестриктаз 6X пурпурный краситель для нанесения на гель.

Этот продукт содержит Ficoll® и SDS, которые делают электрофоретические бэнды более компактными, резкими и яркими. Входящий в состав ЭДТА останавливает происходящие в образце ферментативные реакции. И, наконец, оставшиеся на геле бэнды двух красителей не видны в УФ-свете и не мешают интерпретации результатов.

Поддержка, которая действительно поддерживает

За 45 лет своей деятельности компания NEB накопила богатейший опыт работы с рестриктазами и теперь щедро им делится.

	Еще в 1975 году NEB начала ведение базы ферментов рестрикции REBASE, и сегодня это самый полный и популярный ресурс подобного типа. В REBASE вы можете найти исчерпывающую информацию обо всех когда-либо и кем-либо открытых рестриктазах.
	Поисковик Enzyme Finder позволяет подобрать рестриктазу по нужному сайту рестрикции или образующимся в результате нее концам ДНК.
	С помощью инструмента NEBcutter V2.0 вы сможете не только построить модель расщепления заданной последовательности ДНК конкретными результатами, но и сгенерировать виртуальную электрофореграмму.
	Функционал инструмента NEBcloner® или мобильного приложения NEBtools ( iOS, Android) значительно облегчает задачу подбора оптимальных условий реакции двойной рестрикции.

Наконец, ни на одном веб-ресурсе вы не найдете столько полезных материалов об эндонуклеазах рестрикции, как на сайте New England Biolabs:

22 руководства - bit.ly/2BdRua7,
14 таблиц подбора - bit.ly/2RZ48UH,
13 протоколов - bit.ly/2Sj3NeQ,
Ответы на частые вопросы - bit.ly/2CYXDa6,
22 обучающих видео - bit.ly/2CVWiki и даже выпуск ТВ-шоу NEB - bit.ly/2RoKmgh.

Каталог рестриктаз NEB →

Чтобы сделать заказ или узнать дополнительную информацию, позвоните по телефону 8 (495) 215-02-22 или 8 (800) 333‑22‑26, напишите по электронной почте info@skygen.сom или свяжитесь с менеджером по вашему региону.