#21 Новые продукты для проведения реакции обратной транскрипции от New England Biolabs

Сегодня мы рады представить всем исследователям, работающим с образцами РНК два абсолютно новых продукта для проведения реакции обратной транскрипции. Это набор для RT-PCR OneTaq One-Step и обратная транскриптаза WarmStart RTx..

В условиях динамичных изменений и постоянного развития методов работы с РНК, исследователи компании New England обеспечивают своих клиентов новыми инструментами, которые позволят оптимизировать проведение реакций и ускорить ежедневный протокол. В данном случае, появляется возможность проводить реакцию обратной транскрипции и ПЦР полученной кДНК в один этап при помощи набора RT-PCR OneTaq One-Step. С другой стороны, второй продукт - обратная транскриптаза WarmStart RTx - это первая и единственная на рынке обратная транскриптаза, которая теряет активность при температуре реакционной смеси ниже 40°С.

Проведение реакции обратной транскрипции и ПЦР полученной кДНК

Если вы работаете в лаборатории с образцами РНК, зачастую, после этапа проведения реакции обратной транскрипции следующим этапом является ПЦР полученной кДНК. Таким образом, возможность объединить эти два этапа и провести их в один этап , с использованием ген-специфичных праймеров упростит протокол и ускорит время получения результата исследования.

Набор для RT-PCR OneTaq One-Step содержит три компонента, которые обеспечивают успешное проведение каждого этапа - готовая смесь ферментов OneTaq One-Step содержит ферменты NEB: обратную транскриптазу , ингибитор РНКазы Н, и ДНК-полимеразу One Taq Hot Start.

Protoscript II - является мутантом обратной транскриплазы M-Mulv с уменьшенной активностью РНКазы Н и повышенной термостабильностью. One Taq Hot Start. ДНК-полимераза представляет собой смесь Hot Start Taq и второй полимеразы с редактирующей способностью. Такая комбинация позволяет достичь высокого выхода ПЦР при минимальной оптимизации условий реакции.

Кроме того, в состав набора входят две смеси для постановки реакции: реакционная смесь OneTaq One-Step создает идеальную буферную среду для работы ферментов, входящих в состав набора. В то же время реакционная смесь для нанесения на гель One Taq Quick-Load One-Step содержит красители, которые позволяют нанести образец, по окончании реакции на гель.

Преимущества набора для RT-PCR OneTaq One-Step:

Возможность амплифицировать длинные ампликоны длиной до 9 000 нуклеотидов

Возможность проведения мультиплексной реакции детектирования (2-3 участка интереса)

В качестве матрицы могут быть использованы как образцы РНК, так и ДНК

Набор дает возможность детектировать, например, наличие GADPH при количестве 0,1 пг в реакционной смеси

Единственная в мире обратная транскриптаза, активируемая при помощи температуры - WarmStart RTx

Обратная транскриптаза WarmStart RTx - это уникальная, смоделированная in silico РНК-зависимая ДНК-полимераза, которая, благодаря использованию совместно с аптамером ингибирует свою активность ниже 40°С.

WarmStart Rx позволяет проводить синтез кДНК, с использованием в качестве матрицы РНК и одноцепочечной ДНК.

WarmStart Rx обладает РНК-азной активностью, является надежным инструментом для детектирования РНК в реакции амплификации. Фермент отличается от других продуктов линейки тем, что оптимизирован для использования в реакции обратной транскрипции в условиях изотермальной амплификации (RT-LAMP). Так, при комбинации различных обратных транскриптаз с этапом амплифкации с использованием ДНК-полимеразы Bst.2, WarmStart продемонстрировала наилучшие результаты. Позволяет проводить постановку реакции при комнатной температуре и увеличивают специфичность реакции амплификации.

Преимущества обратной транскриптазы WarmStart RTx

Технология WarmStart увеличивает специфичность реакции

Увеличенная термостабильность позволяет проводить реакцию при повышенных температурах

Ускорение протокола позволяет уменьшать время, затрачиваемое на детекцию

Уменьшение количества образца для реакции TR-LAMP (0,1 пг для РНК)& синтеза кДНК (1 пг)

Мы будем рады ответить на ваши вопросы, и порекомендовать другие реактивы для синтеза кДНК, а также продукты, используемые для работы с РНК.