Сегодня мы рады представить всем исследователям, работающим с образцами РНК два абсолютно новых продукта для проведения реакции обратной транскрипции. Это набор для RT-PCR OneTaq One-Step и обратная транскриптаза WarmStart RTx..
В условиях динамичных изменений и постоянного развития методов работы с РНК, исследователи компании New England обеспечивают своих клиентов новыми инструментами, которые позволят оптимизировать проведение реакций и ускорить ежедневный протокол. В данном случае, появляется возможность проводить реакцию обратной транскрипции и ПЦР полученной кДНК в один этап при помощи набора RT-PCR OneTaq One-Step. С другой стороны, второй продукт - обратная транскриптаза WarmStart RTx - это первая и единственная на рынке обратная транскриптаза, которая теряет активность при температуре реакционной смеси ниже 40°С.
Проведение реакции обратной транскрипции и ПЦР полученной кДНК
Если вы работаете в лаборатории с образцами РНК, зачастую, после этапа проведения реакции обратной транскрипции следующим этапом является ПЦР полученной кДНК. Таким образом, возможность объединить эти два этапа и провести их в один этап , с использованием ген-специфичных праймеров упростит протокол и ускорит время получения результата исследования.
Набор для RT-PCR OneTaq One-Step содержит три компонента, которые обеспечивают успешное проведение каждого этапа - готовая смесь ферментов OneTaq One-Step содержит ферменты NEB: обратную транскриптазу , ингибитор РНКазы Н, и ДНК-полимеразу One Taq Hot Start.
Protoscript II - является мутантом обратной транскриплазы M-Mulv с уменьшенной активностью РНКазы Н и повышенной термостабильностью. One Taq Hot Start. ДНК-полимераза представляет собой смесь Hot Start Taq и второй полимеразы с редактирующей способностью. Такая комбинация позволяет достичь высокого выхода ПЦР при минимальной оптимизации условий реакции.
Кроме того, в состав набора входят две смеси для постановки реакции: реакционная смесь OneTaq One-Step создает идеальную буферную среду для работы ферментов, входящих в состав набора. В то же время реакционная смесь для нанесения на гель One Taq Quick-Load One-Step содержит красители, которые позволяют нанести образец, по окончании реакции на гель.
Преимущества набора для RT-PCR OneTaq One-Step:
Единственная в мире обратная транскриптаза, активируемая при помощи температуры - WarmStart RTx
Обратная транскриптаза WarmStart RTx - это уникальная, смоделированная in silico РНК-зависимая ДНК-полимераза, которая, благодаря использованию совместно с аптамером ингибирует свою активность ниже 40°С.
WarmStart Rx позволяет проводить синтез кДНК, с использованием в качестве матрицы РНК и одноцепочечной ДНК.
WarmStart Rx обладает РНК-азной активностью, является надежным инструментом для детектирования РНК в реакции амплификации. Фермент отличается от других продуктов линейки тем, что оптимизирован для использования в реакции обратной транскрипции в условиях изотермальной амплификации (RT-LAMP). Так, при комбинации различных обратных транскриптаз с этапом амплифкации с использованием ДНК-полимеразы Bst.2, WarmStart продемонстрировала наилучшие результаты. Позволяет проводить постановку реакции при комнатной температуре и увеличивают специфичность реакции амплификации.
Преимущества обратной транскриптазы WarmStart RTx
Мы будем рады ответить на ваши вопросы, и порекомендовать другие реактивы для синтеза кДНК, а также продукты, используемые для работы с РНК.