расходные материалы
для лабораторий
Набор NEBuilder® HiFi для сборки и клонирования больших ДНК-конструкций
| Артикул | Название товара | Цена* | |
|---|---|---|---|
| E2623 S | Набор NEBuilder® HiFi для сборки и клонирования больших ДНК-конструкций (20 реакций) | по запросу |
Набор NEBuilder® HiFi предназначен для бесшовной сборки и клонирования ДНК-конструкций размером от 15 кб.
Данный метод позволяет производить сборку из нескольких фрагментов, независимо от их длины и концевых групп, а также использовать для сборки как одноцепочечные олигонуклеотиды, так и дцДНК.
Сборка происходит в одной пробирке при помощи изотермической реакции, в которой участвуют следующие ферменты:
- 5’-экзонуклеаза удаляет основания с 5’- концов двуцепочечных фрагментов ДНК. Образуются выступающие липкие концы, которые гибридизуются при постепенном охлаждении реакционной смеси, объединяя фрагменты друг с другом;
- ДНК-полимераза закрывает пропуски;
- ДНК-лигаза ковалентно сшивает фрагменты ДНК.
Вариации набора NEBuilder® HiFi
- Набор NEBuilder® HiFi для сборки и клонирования ДНК-конструкций (E5520) содержит компетентные клетки NEB 5-альфа E. coli.
- Набор NEBuilder® HiFi для сборки и клонирования больших ДНК-конструкций (E2623) содержит компетентные клетки NEB 10-бета E. coli.
- Готовая смесь NEBuilder® HiFi для сборки ДНК-конструкций (E2621) не содержит компетентных клеток.
Компетентные клетки NEB 5-альфа E.coli отлично подходят для рутинных задач и сборки фрагментов до 15 кб, для сборки более крупных фрагментов рекомендуется использовать компетентные клетки 10-бета E.coli или электрокомпетентные клетки 10-бета E.coli. Если собираемые фрагменты содержат повторяющиеся последовательности, то лучше всего подходят NEB® Stable E. coli.
Наборы NEBuilder HiFi могут применяться для различных видов сборок:
| Название компонента | Концентрация | Температура хранения |
| Положительный контроль NEBuilder® | - | -20°C |
| Компетентные клетки NEB® 10-бета E.coli высокой эффективности | - | -80°C |
| pUC19 Vector | 50 пкг/мкл | -20°C |
| Питательная среда SOC | - | 4°C |
| Готовая смесь NEBuilder® HiFi DNA Assembly Master Mix | 2Х | -20°C |
