Нанопорус - портативный прибор для секвенирования длинных прочтений, обеспечивающий доступ в режиме реального времени к результатам секвенирования.
Ключевым компонентом (и основным расходным материалом) нанопровых секвенаторов является проточная ячейка.
Процесс секвенирования происходит в камере ячейки, содержащей непроводящую мембрану, в которую встроены проводящие белковые нанопоры. Обе стороны мембраны омывают растворы электролитов.
Во время пробоподготовки к концам фрагментов нуклеиновых кислот пришиваются специальные моторные белки. При попадании образца в камеру проточной ячейки эти белки связываются с нанопорами.
При запуске прибора между сторонами мембраны возникает разность потенциалов. Под действием электрического поля и при участии молекул АТФ моторные белки расплетают двухцепочечную нуклеиновую кислоту и направляют одну из цепей в нанопору. (При этом вторая цепь может присоединиться к соседней поре либо остаться в растворе.)
Дальнейшее движение фрагмента нуклеиновой кислоты через канал осуществляется за счет его отрицательного заряда. Одновременно с исследуемой молекулой под напряжением через нанопоры движутся ионы, содержащиеся в растворах электролитов. Поскольку размер нуклеотидов неодинаков, величина ионного тока зависит от последовательности участка нуклеиновой кислоты, проходящего через канал в данный момент времени. В ходе секвенирования происходит регистрация этого тока.
Таким образом, первичные данные нанопорового секвенирования представляют собой совокупность скачков силы тока ионов.
После секвенирования одного фрагмента нанопора остается активной и может аналогично пропустить через себя множество других цепей нуклеиновых кислот.
Бейсколлинг – распознавание нуклеотидов по исходному сигналу – осуществляет специальное программное обеспечение.
Через порт USB 3.0 секвенатор Нанопорус может быть подключен к управляющему ноутбуку или стационарному компьютеру, удовлетворяющему следующим характеристикам:
Нанопоровый секвенатор «Нанопорус» полностью совместим с программным обеспечением MinKNOW (Oxford Nanopore Technologies). Программа MinKNOW осуществляет контроль запуска – температуру камеры проточной ячейки, величину напряжения, а также регистрирует и сохраняет данные о величине ионного тока через нанопоры. Интерфейс отображает количество прочтений, их длину, процент работающих пор и дополнительную статистику. Данные, полученные на Нанопорусе, позволяют определить последовательность нуклеиновых кислот (ДНК, РНК), а также получить информацию о модификациях. Возможна установка полностью автономного программного обеспечения «Нанопорус».
По вопросам обращайтесь на sales@skygen.com