#19 Реагенты для проведения обратной транскрипции от New England Biolabs

31.05.2015

Для опытных и начинающих пользователей обратных транскриптаз мы хотим представить как базовые ферменты для обратной транскрипции - классические обратные транскриптазы M-MuLV и , на которые вы сможете положиться при проведении рутинных экспериментов, так и обратную транскриптазу Protoscript II, - которая подойдет для сложных матриц. Все ферменты возможно приобрести как в виде отдельных ферментов, так и в составе наборов.

Давайте теперь остановимся на каждом из ферментов по отдельности. Начнем мы с фермента, который собрал наибольшее количество положительных отзывов от пользователей в России - M-MuLV. Все пользователи отметили прежде всего надежность и высокое качество классического фермента для обратной транскрипции.

Одновременно с этим New England Biolabs представляет обратную транскриптазу WarmStart RTx - которая, совмещая в себе механизм Hot Start впервые для обратных транскриптаз, рекомендуется для совместного использования с изотермальной амплификацией.

1.Обратная транскриптаза M-MuLV

Кратко о M-MuLV:

Обратная транскриптаза Moloney Murin Leukemia Virus (M-MuLV) синтезирует комплементарную ДНК-цепь как с РНК, так и с одноцепочечной ДНК

Надежная обратная транскриптаза для различных типов образцов

Выделена из рекомбинантного источника: E.Coli, несущая ген кодирующий M-MuLV

Стандартная реакционная температура (37-45°C)

Не обладает 3'-5' экзонуклеазной активностью

Инактивируется за 20 мин при температуре 65°С

Поставляется как в виде индивидуального фермента, так и в виде набора

2.Обратная транскриптаза Protoscript II

Кратко о Protoscript II:

Рекомбинантный мутант M-MuLV обратной транскриптазы с увеличенной термостабильностью и уменьшенной активностью RNase H

Увеличенная температура реакции (37-50°C)

Выделяется из E.Coli, несущей ген, кодирующий мутантную M-MuLV (RNase H-)

Генерирует кДНК длиной до 12 000 нуклеотидов

Благодаря возможности проводить реакцию при повышенной температуре до 50°C, повышается выход, специфичность реакции, а также длина ампликона

Рекомендуется специалистами NEB как аналог обратной транскриптазы SuperScript II

Инактивируется за 20 мин при температуре 65°С

Поставляется как в виде индивидуального фермента, так и в виде набора

3.Обратная транскриптаза AMV

Кратко об AMV:

Обратная транскриптаза Avian Myeloblastosis Virus (AMV) синтезирует комплементарную ДНК-цепь как с РНК, так и с одноцепочечной ДНК

Надежная транскрипция для широкого температурного диапазона (37-52°C)

Может быть использована для реакций, требующих повышенную температуру реакции

Выделяется из Avian Myeloblastosis Virus

Поставляется как в виде индивидуального фермента, так и в виде набора

4.Обратная транскриптаза WarmStart RTx

Кратко о WarmStart RTx:

Уникальная обратная транскриптаза с in silico дизайном, которая поставляется вместе с аптамером, предотвращающим начало реакции при температуре ниже 40°С

Синтезирует комплементарную ДНК-цепь как с РНК, так и с одноцепочечной ДНК

Выделяется из рекомбинантного источника

Реакционная температура 50-65°С

Подходит для обратной транскрипции с изотермальной амплификацией LAMP

Обладает RNase H активностью

Инактивируется при температуре 80°С в течение 10 мин

Рекомендуется для проведения обратной транскрипции с амплификацией в один этап при температуре 65°С

Поставляется в виде индивидуального фермента

Более подробную информацию вы можете найти в обзоре

В таблице 1 представлены основные характеристики 4-х обратных транскриптаз.

Таблица 1. Основные характеристики обратных транскриптаз от New England Biolabs

Обратная транскриптаза	Артикул	Кол-во реакций	Требуется на одну реакцию, е.а	Кол-во, е.а.	цена в Евро с НДС
Protoscript II (200 000 е.а./мл)	M0368M	20	200	4 000	88,5
	M0368L	50	200	10 000	177
	M0368X	200	200	40 000	637,5
M-MulV (200 000 е.а.)	M0253S	50	200	10 000	77,1
	M0253L	250	200	50 000	311,5
AMV (10 000 е.а./мл)	M0277S	20	10	200	79,1
	M0277L	100	10	1000	316,2
AMV (25 000 е.а./мл)	M0277T	50	10	500	175,8
WarmStart RTx (15 000 е.а./мл)	M0380S	50	-	50 реакций	72,0
	M0380L	250	-	250 реакция	287,9