Активация Т-клеток

Реагент Enceed™ для активации Т-клеток индуцирует активацию и экспансию Т-клеток человека в обогащенной Т-клеточной популяции или мононуклеарных клетках периферической крови (PBMCs). 

• Реагент состоит из биоразлагаемых, покрытых матрицей наночастиц, конъюгированных с анти-CD3 и анти-CD28 антителами. 
• Реагент не повреждает Т-клетки и не снижает их жизнеспособность.
  
• Небольшой размер частиц реагента позволяет легко удалять его путем промывки среды или центрифугирования.
• Рекомендуемый титр 1:200 позволяет достичь достаточной стимуляции у большинства субпопуляций Т-клеток. Для особых целей оптимальный титр подбирается экспериментально. Избыточное количество реагента Enceed™ может привести к чрезмерной активации Т-клеток и последующей клеточной гибели.
• Оптимальный уровень экспансии достигается за период до 13 дней после применения реагента Enceed™. Возможно проведение повторной стимуляции по истечении 13 дней.
• Для более эффективной активации реагент Enceed™ может быть использован совместно с цитокинами (IL-2, IL-15 и IL-7 человека). 

Эффективность CD3/CD28 для активации Т-клеток

Сигнал активации (CD25&CD69) успешно индуцируется с помощью реагента Enceed™ T cell activation.

PBMCs были изолированы с помощью CytoSinct™ CD4 и CD8 наночастиц, затем активированы с помощью реагентов компании GenScript и другого производителя. Спустя 48 часов экспрессия активирующих маркеров (CD25 и CD69) на поверхности клеток определена с помощью проточной цитометрии. Реагент Enceed™ для активации Т-клеток активирует больший процент клеток в сравнении с реагентом известного производителя-конкурента.

Высокая экспансия и жизнеспособность клеток после активации

После активации с помощью Enceed™ клетки демонстрируют высокий уровень экспансии.

PBMCs были изолированы с помощью CytoSinct™ CD4 и CD8 наночастиц, затем активированы с помощью реагентов компании GenScript и другого производителя, затем культивированы в течение 17 дней. Количество клеток и % жизнеспособности оценивались на день 0, 2, 5, 9, 12, 14 и 17. Результаты демонстрируют, что при использовании реагентов GenScript достигается более высокая экспансия и сопоставимая с производителем-конкурентом жизнеспособность активированных клеток.

Сравнение экспансии Т-клеток (левый график) и жизнеспособности Т-клеток (правый график) при использовании реагента Enceed™ для активации Т-клеток и реагента производителя-конкурента.

Распределение субпопуляции Т-клеток после активации

Менее дифференцированная субпопуляция Т-клеток (TSCM+TCM) наиболее представлена после экспансии

PBMCs были разделены с помощью CytoSinct™ CD4 и CD8 наночастиц, затем активированы с помощью реагентов компании GenScript и другого производителя, затем культивированы определенный период времени. Поверхностные маркеры определялись в день 12 и день 17 методом проточной цитометрии.

Сравнение субпопуляционного состава Т-клеток на день 12 (левый график) и день 17 (правый график), полученных с помощью реагента Enceed™ для активации Т-клеток и реагента производителя-конкурента.

Т-клетки, обогащенные наночастицами CytoSinct™ CD4 и CD8, были активированы реагентом Enceed™. Спустя 2 дня T-клетки были окрашены антителами CD25-PE и CD69-APC. Анализ экспрессии CD25 и CD69 проводился с помощью проточной цитометрии.

T-клетки, окрашенные carboxy fluorescein succinimidyl ester (CFSE), были стимулированы реагентом Enceed™ T cell Activation. Спустя 7 дней пролиферация была измерена с помощью проточной цитометрии.

Только для исследовательских целей. Не предназначен для терапевтического или диагностического применения у людей и животных.