Реактивы и оборудование
для лабораторий
0

#5 Ваш новый взгляд на колоночное выделение ДНК с наборами ISOLATE II от Bioline

09.09.2014

В последние годы среди существующих методов выделения нуклеиновых кислот все большей популярностью пользуется колоночное выделение. Каждый день в лабораториях сталкиваются с различными задачами на этапе пробоподготовки по выделению ДНК из широкого спектра биологических образцов.

Сегодня компания SkyGen представляет новый продукт на российском рынке – наборы для колоночного выделения ISOLATE II, которые сочетают в себе высокую чистоту полученного продукта с высоким выходом и чрезвычайно привлекательными ценами. Давайте подробнее остановимся на описании каждого из наборов для выделения ДНК от BIOLINE.

Если Вам необходимо выделить геномную ДНК из тканей животных, бактериальных клеток, биологических жидкостей организмов, образцов биопсии, слюны, замороженных тканей, клеточных культур, фекалий млекопитающих, из волос, насекомых, образцов тканей в парафине, хвостов грызунов, из вирусов и из дрожжей – Вашим лучшим выбором будет являться набор для выделения геномной ДНК ISOLATE II (Genomic DNA Kit).

На первом этапе первичный материал подвергается лизированию с помощью протеиназы К, далее ДНК специфично иммобилизуется на поверхности силика-мембраны в присутствии хаотропных ионов, откуда после промывания элюируется ДНК с высокой чистотой (соотношение А260/А280= 1,7-1,9). Оптимизированное использованием для широкого разнообразия образцов обеспечиваются при помощи 17 протоколов. Выделенная ДНК может далее использоваться для ПЦР, rtПЦР, секвенирования следующего поколения (NGS). Возможно выделение до 35 мкг геномной ДНК из одного препарата, а время выделения после этапа лизиса составляет порядка 20 мин.

Для выделения плазмидной ДНК из бактериальных клеток, клеточных культур, Р1 конструктов и космид мы рекомендуем воспользоваться набором для выделения плазмидной ДНК ISOLATE II (Plasmid DNA Mini kit).

С помощью набора возможно выделение как высококопийных, так и низкокопийных плазмид, с высокой чистотой выделения (соотношение А260/А280 >1,8). Количество выделяемой плазмидной ДНК может составлять до 40 мкг из 10 мл культуры (на примере E.Coli). ДНК может использоваться далее для ПЦР, трансформации, клонирования, секвенирования, рестрикционного анализа и др. Протокол выделения позволят выделять ДНК из 18 препаратов за 25 минут, и состоит из этапов щелочного лизиса, очищения лизата, связывание плазмидной ДНК с силикагелевой мембраной колонки, промывание и последующее элюирование. Для случая низкокопийных плазмид, Р1 конструктов и космид предусмотрен отдельный вариант протокола, в котором используются увеличенные объемы буферных растворов.

В случае, если выделение ДНК планируется из крови, сыворотки крови, биологических жидкостей, бактериальных клеток, клеточных культур и вирусов – мы можем порекомендовать набор ISOLATE II для выделения ДНК из крови (Blood DNA kit). Возможно выделение образцов ДНК, свободных от ПЦР-ингибиторов за 30 минут, с высокой чистотой (соотношение А260/А280= 1,7-1,9) с высоким выходом. Для выделения возможно использовать как свежую кровь, так и замороженную, в том числе с добавками таких популярных коагулянтов как цитраты, ЭДТА, гепарин или ACD. Кроме того, использованием набора возможно выделить бактериальную и вирусную ДНК (например, ДНК HBV) из образцов крови. Для выделения таких образцов ДНК рекомендуется удалить клетки крови центрифугацией. Полученная в результате очистки ДНК может применяться для ПЦР разного типа, Southern Blotting и других ферментативных реакций.

Очень часто перед исследователями встает задача выделить ДНК из геля или из смеси ПЦР-продуктов, для решения обеих этих задач идеальным выбором станет набор для выделения ДНК из продуктов ПЦР и из агарозного геля (PCR and Gel kit). Используя набор, Вы сможете в течение 10 минут очистить ДНК из продуктов ПЦР и за 20 минут выделить ДНК из ТАЕ и TBE агарозных гелей. Полученную с высокой чистотой ДНК (соотношение А260/А280= 1,8-1,9) возможно будет использовать для клонирования, трансфекции, секвенирования и рестрикционного анализа. Особенно важно, что при выделении из ПЦР-смеси фрагментов ДНК длиной от 50 оснований выход составляет от 75 по 90 %, при полном очищении ДНК от праймеров и других низкомолекулярных примесей.

Приобретая любой из продуктов ISOLATE II, Вы сможете быть уверены, что получаете качество и эффективность выделения ДНК, одни из самых высоких среди существующих на сегодняшний день.


Обратная связь

© 2012-2019 SkyGen
Информация и цены на сайте не являются публичной офертой
Изготовление сайта – НБС-Медиа
На нашем веб-сайте мы используем файлы cookie, которые помогают нам создать максимально удобные для посетителя условия пользования сайтом. Если Вы продолжите использовать сайт, мы будем считать что Вас это устраивает. ОK