Набор ExS-Pure™ для ферментативной очистки ПЦР-продуктов

Набор ExS-Pure™ создан для быстрой и простой ферментативной очистки продуктов ПЦР от праймеров и остатков дНТФ. 

Набор состоит из двух рекомбинантных гидролаз: экзонуклеазы I и щелочной фосфотазы креветки. Это сочетание позволяет разрушить все нежелательные остатки нуклеотидов, которые могут отрицательно повлиять на качество дальнейшего анализа, например при поиске SNP, генотипировании или клонировании. 

Принцип работы

Экзонуклеаза I имеет сильную 3’-экзонуклеазную активность. Вступая в реакцию при 37 ºC, фермент деградирует одноцепочечные праймирующие олигонуклеотиды, но не оказывает никакого влияния на двуцепочечные фрагменты. Щелочная фосфотаза креветки деактивирует дНТФ, удалением 5’-фосфата. Оба фермента полностью инактивируются при нагревании реакционной смеси до 90 ºC за 1 минуту. Комбинация двух ферментов обеспечивает полную очистку реакции без необходимости смены буфера. 

Преимущества

• 5-минутный протокол; 
• Удаляет праймеры и дНТФ в продуктах ПЦР;
• Реакция в 1 пробирке;
• Новейшее поколение термолабильных ферментов;
• Легко включается в автоматизированные процессы;
• 100% восстановление образца.

Простейший протокол 

Минимальное время работы: просто добавьте ExS-Pure™ к ПЦР-продукту и процесс очистки пройдет в течении 5 минут в стандартном термоциклере. 

100% восстановление образца 

С ExS-Pure™ нет необходимости прибегать к трудоемким и дорогостоящим методам очистки, таким как гель-электрофорез, колоночная или магнитная очистка. И короткие, и длинные фрагменты ДНК остаются интактными после обработки. 

Максимальное качество данных

Секвенирование ДНК, анализ SNP и многие другие применения требуют тщательной очистки продуктов ПЦР. При секвенировании ДНК, не включённые в цепь дНТФ и остатки праймеров могут вызвать высокий уровень шума и неправильное прочтение нуклеотидов. С ExS-Pure™ вы эффективно удалите эти загрязнения и увеличите длину прочтения и качество обработки данных.

Высокое качество секвенирования после обработки ExS-Pure™

На рисунке изображен образец хроматограммы, полученной после секвенирования с помощью набора BrilliantDye® v1.1 и полимера NimaPOP-7 на генетическом анализаторе 3130.