×

Дорогие друзья!

Совсем скоро запуск нашего нового сайта, где будет всё самое интересное!

Актуальная информация по тел. 8 800 333 12 26, 8 456 215 02 22 или у наших менеджеров.

Реактивы и оборудование
для лабораторий

#52 Новинки портфолио для работы с РНК от New England Biolabs

Сегодня мы решили рассказать немного о портфолио реагентов для работы с РНК от New England Biolabs, и приурочить это к нашей акции со скидками на продукты этой линейки.

Для многих продукты NEB – это прежде всего продукты для клонирования и ПЦР, но так как реагенты для работы с РНК являются одной из самых высокотехнологичных и сложных частей портфолио любого бренда – именно тут NEB может воспользоваться всеми преимуществами мощного собственного R&D отдела и предложить самые продвинутые решения на рынке.

Начать рассказ мы можем с наборов для синтеза РНК, которые представлены в различных форматах. Синтез РНК in vitro требует ДНК-матрицы, РНК-полимеразы, набора NTPs, и других компонентов. При этом, для синтеза РНК с высоким выходом потребуется оптимизация количества и типа каждого компонента. NEB предлагает сегодня 5 наборов для синтеза РНК, каждый из которых был оптимизирован для получения рассчитанного количества РНК.

Набор для синтеза РНК HiScribe™ T7 High Yield &

Набор для синтеза РНК HiScribe™ T7 Quick High Yield

Набор HiScribe T7 High Yield RNA Synthesis Kit (NEB #E2040) позволяет получить РНК с использованием разного размера. Вариации протокола позвляют получить предсказуемый результат даже при увеличении времени реакции и уменьшении количества матрицы. Также предлагается протокол для частичной или полного встраивания модифицированных или меченых нуклеотидов в тело транскрипта и аналогов CAP структуры на 5’- конце РНК. Набор для синтеза РНК HiScribe™ T7 Quick High Yield (NEB #E2050) включает в себя в ферменты в виде готовых смесей, позволяя провести эксперимент быстрее. ДНКаза I и хлорид лития включены в состав набора для избавления от ДНК и быстрой очистки РНК.

кар 1.png

Большинство эукариотических мРНК требуют наличия на 5’- конце кэп-структуры 7-метил-гуанозина (m7G) а также поли(А) хвоста на на 3’- конце для успешного процесса трансляции. Набор для синтеза мРНК HiScribe™ T7 ARCA (NEB #2060S) был разработан для синтеза кэпированой и с наличием хвоста мРНК для дальнейшего использования в ряде протоколов. Кэпированная мРНК синтзеруется при помощи котранскрипционного встраивания Anti-Reverse Cap Analogue, ARCA, с ипользованием T7 РНК-полимеразы. Поли(А) хвост добавляется E.Coli poly(A) полимеразой. Этот набор также доступен без E.Coli poly(A) полимеразы (NEB E2065S) для использования с ДНК-матрицами, которые кодируют поли(А) хвост, или не требуют его. Оба наборы имеют в своем составе ДНКаза I и хлорид лития от ДНК и быстрой очистки мРНК.

кар 3.jpg

Рис.2 Протокол синтеза мРНК с использованием набора для синтеза мРНК HiScribe™ T7 ARCA (NEB #2060S)

Преимущества наборов для синтеза РНК от NEB

-          Быстрый протокол

-          Вариабельность протокола – возможно встраивание аналога кэп-структуры, мечение при помощи меток и модифицированных нуклеотидов

-          Высокий выход – до 180 мкг РНК из стандартной реакции в 20 мкл (E2050)

-          Получение транскриптов высокого качества

-          Показана высокая эффективность трансляции с правильно ориентированной ARCA кэп (E2060&E2065)

На рис 3. Показан выход синтеза РНК из различных матриц с использованием набора для синтеза РНК HiScribe™ T7 High Yield.

карт 2.jpg

Рис. 3 Количество синтезированной РНК для трех различных матриц с различным временем инкубации при 37С.

Будем рады, если информация в обзоре будет полезна в вашей ежедневной работе! Информация об акции на наборы для синтеза РНК представлена в разделе Акции!

к списку обзоров