Реактивы, оборудование и
расходные материалы
для лабораторий
8 (800) 333-12-26 info@skygen.com
пн-пт: 9:30-18:00 по МСК

NimaGen

лого NimaGen.JPG NimaGen - голландская компания, поставляющая альтернативные реактивы для секвенаторов Applied Biosystems. В портфолио NimaGen входят различные наборы, буферы и стандарты, совместимые с платформами ABI 3100, 3130, 3130xl, 3500, 3500xl, 3730 и 3730xl.

Сайт производителя.jpg

Каталог реагентов NimaGen



Скачать каталог

Секвенирование по Сэнгеру - метод секвенирования ДНК, основанный на селективном включении терминирующих дидезоксинуклеотидов ДНК-полимеразой во время репликации ДНК in vitro

Этот метод был разработан Фредериком Сэнгером и его коллегами в 1977 г. и, несмотря на появление массового параллельного секвенирования (NGS), метод Сэнгера остается золотым стандартом секвенирования и широко используется для небольших проектов или валидации результатов NGS. 

Флуоресцентный анализ фрагментов ДНК является одним из самых востребованных методов в молекулярной биологии. Метод с очень высоким разрешением и воспроизводимостью измеряет относительный размер фрагментов ДНК методом капиллярного электрофореза флуоресцентно меченых фрагментов ДНК на автоматическом генетическом анализаторе, использующем флуоресцентные стандарты размеров для сравнения.

Этапы работы

этапы работы.JPG

На первом этапе необходимо выделить и очистить ДНК и амплифицировать интересующие фрагменты. Затем очистить реакционную смесь от остатков праймеров и невключенных в цепь дезоксинуклеотидфосфатов. Для этого этапа подойдут наборы AmpliClean или ExS-Pure.

После проверки качества очистки и оценки количества ДНК (например, при помощи биоанализаторов от Agilent Technologies)  можно приступить к реакции терминирующего секвенирования: введения флуоресцентной метки в фрагменты ДНК разной длины, которые будут далее анализироваться на одной из платформ. Фрагменты разной длины образуются благодаря обрыву цепи во время ПЦР, который происходит во время встраивания флуоресцентно меченых дидезоксинуклеотидов, так называемых красителей-терминаторов. Для решения этой задачи вам потребуются наборы BrilliantDye.

После проведения реакции секвенирования грамотная очистка образца при помощи наборов D-Pure или iX-Pure обеспечивает стабильность высокого качества результатов секвенирования. 

Последним этапом является проведение капиллярного электрофореза, и, по желанию, очистка капилляров. Для ABI анализаторов потребуется заполнить капилляры вашего прибора полимером, тип которого зависит от прибора и задач эксперимента. Между собой полимеры отличаются процентным содержанием диметилакриламида.

Мы используем файлы cookie для улучшения работы сайта. Узнать больше.

Настройки файлов cookie

Мы используем файлы cookie для улучшения работы сайта, анализа трафика и показа персонализированной рекламы. Вы можете изменить настройки в любой момент.

Категории файлов cookie:

Необходимые

Эти cookie обеспечивают базовую функциональность сайта — вход в аккаунт, безопасность, оформление заказов. Отключение невозможно.

Функциональные

Функциональные cookie используются для обеспечения работы отдельных функций сайта, а также для запоминания ряда пользовательских предпочтений (например, выбранный язык, товары в корзине), с целью улучшения качества предоставляемого сервиса.

Отключение этого типа файлов cookie может привести к тому, что некоторые сервисы или функции сайта станут недоступны или будут работать некорректно. В результате, вам может потребоваться повторно вводить определённую информацию или настраивать предпочтения при каждом посещении сайта вручную.

Аналитические

Аналитические файлы cookie, включая сторонние аналитические cookie, помогают нам понять, как вы взаимодействуете с нашим сайтом. Эти файлы не собирают информацию, позволяющую установить вашу личность. Все данные обрабатываются в агрегированной и анонимной форме.

Рекламные

Рекламные cookie, включая сторонние, используются для создания пользовательских профилей и показа рекламы, соответствующей вашим интересам и предпочтениям при просмотре сайтов.

Эти cookie позволяют персонализировать рекламные сообщения, которые вы видите, делая их более релевантными. Они также могут использоваться для ограничения количества показов одной и той же рекламы и для оценки эффективности рекламных кампаний.