Реактивы и оборудование
для лабораторий

Набор Q5 для HF ПЦР

Одним из приоритетных направлений разработок компании New England Biolabs является вся линейка ферментов и расходных материалов для ПЦР. Чтобы помочь пользователям ферментов разобраться в многообразии ДНК-полимераз, мы подготовили обзоры, посвященные в том числе изотермальной амплификации и высокоточным ДНК-полимеразам. Отдельно была вынесена информация по ДНК-полимеразе Q5, которая на сегодняшний день является самой точной ДНК-полимеразой на рынке.

Для высокого качества экспериментов и получаемых результатов бывает важна точность амплификации, которую обеспечивает ДНК-полимераза. Например, высокая точность амплификации необходима при клонировании продуктов ПЦР с целью дальнейшего изучения экспрессии генов, при анализе однонуклеотидных полиморфизмов, при анализе РНК методом отПЦР, при секвенировании клонов и секвенировании следующего поколения.

Набор Q5® для HF ПЦР предназначен для высокоточной амплификации ДНК. Главным компонентом набора является Master Mix Q5® для HF ПЦР (смесь ДНК-полимеразы, дНТФ, Mg2+ и соответствующего буфера). Остается только внести праймеры и ДНК-матрицу, и реакционная смесь для ПЦР готова!

В качестве ДНК-полимеразы в наборе используется Q5® HF ДНК-полимераза - высокоточная термостабильная ДНК-полимераза, обладающая 3’ - 5’ экзонуклеазной активностью. Полимераза сшита с Sso7d доменом, который позволяет значительно улучшить сродство ДНК-полимеразы к матрице.

Вероятность ошибки при амплификации Q5 HF ДНК-полимеразой более чем в 100 раз ниже по сравнению с Taq ДНК-полимеразой и в 12 раз ниже вероятности ошибки Pfu ДНК-полимеразы.

К другим достоинствам этой полимеразы относятся высокая скорость амплификации (скорость элонгации достигает 10 сек/1 кб), хорошее качество амплификации GC-богатых фрагментов ДНК, а также возможность амплифицировать длинные фрагменты ДНК (E.coli, ДНК бактериофага λ - до 20 т.п.н., геномная ДНК эукариот – до 10 т.п.н.).

На рисунке справа показаны примеры амплификации Q5 HF ДНК-полимеразой фрагментов ДНК, имеющих разный GC-состав.

По окончании ПЦР можно визуализировать результаты при помощи агарозного гель-электрофореза с помощью красителя для нанесения на гель и маркера длин ДНК Quick-Load® 2-Log, входящими в состав набора.

Маркер длин ДНК Quick-Load® 2-Log представляет собой смесь 19-ти фрагментов ДНК длиной от 100 п.н. до 10 т.п.н., полученных Quick-Load 2-Log рестрикцией плазмидной ДНК. Бэнды, соответствующие фрагментам ДНК 0.5, 1 и 3 т.п.н., имеют на окрашенном геле повышенную интенсивность и могут служить в качестве референсных.

Электрофореграмма разделения маркера длин ДНК Quick-Load 2-Log в 1% агарозном геле показана на рисунке справа.

В состав набора входят:
Master Mix Q5 HF для ПЦР, 2X,
Очищенная от нуклеаз вода,
Краситель для нанесения на гель, синий, 6Х,
Маркер Quick-Load® 2-Log 0.1-10 т.п.н. длин ДНК, 100 мкг/мл.

Температура хранения: -20°С

Химический состав:

Master Mix Q5 HF для ПЦР (2X): смесь Q5® HF ДНК-полимеразы, дНТФ, Mg2+ и буфера для Q5® ДНК-полимераз

Краситель для нанесения на гель, синий (1Х): 2.5% Фиколл 400, 11 мМ ЭДТА, 3.3 мМ трис-гидрохлорид, 0.017% SDS, 0.015% бромфеноловый синий, pH 8.0 при 25°C

Маркер Quick-Load 2-Log 0.1-10 т.п.н. длин ДНК: раствор рестриктных фрагментов ДНК длиной 10 т.п.н., 8 т.п.н., 6 т.п.н., 5 т.п.н., 4 т.п.н., 3 т.п.н., 2 т.п.н., 1.5 т.п.н., 1.2 т.п.н., 1 т.п.н., 900 п.н., 800 п.н., 700 п.н., 600 п.н., 500/517 п.н., 400 п.н., 300 п.н., 200 п.н., 100 п.н.
в буфере, содержащем:
2.5% Фиколл 400, 11 мМ ЭДТА, 3.3 мМ трис-гидрохлорид, 0.017% SDS, 0.015% бромфеноловый синий, pH 8.0 при 25°C.

Примечания:
Для определения оптимальной температуры отжига настоятельно рекомендуется пользоваться ТМ-калькулятором NEB.

Онлайн-инструменты:

Tm Calculator

Артикул Название товара Цена
E0555 S Набор Q5® для HF ПЦР
Концентрация:-    Кол-во:50 реакций  
7956 р.
E0555 L Набор Q5® для HF ПЦР
Концентрация:-    Кол-во:200 реакций  
26927 р.

Указанные на сайте цены включают НДС. Цена указана со склада в Москве

Обычно с этим товаром покупают

Артикул Название товара Цена
B9027 S Буфер для Q5® ДНК-полимеразы
Концентрация:5X    Кол-во:6 мл  
B7021 S Краситель для нанесения на гель, синий
Концентрация:6X    Кол-во:6 мл  
N0469 S Маркер Quick-Load® 2-Log 0.1-10 т.п.н. длин ДНК
Концентрация:100 мкг/мл    Кол-во:250 реакций  
N0469 L Маркер Quick-Load® 2-Log 0.1-10 т.п.н. длин ДНК
Концентрация:100 мкг/мл    Кол-во:375 реакций  
N0447 S Смесь дезоксинуклеотидов (дАТФ, дЦТФ, дГТФ и дТТФ) (8 мкмоль)
Концентрация:10 мМ    Кол-во:8 мкмоль  
N0447 L Смесь дезоксинуклеотидов (дАТФ, дЦТФ, дГТФ и дТТФ)
Концентрация:10 мМ    Кол-во:40 мкмоль  
M0492 S Готовая смесь с Q5® HF для ПЦР
Концентрация:2X    Кол-во:100 реакций  
M0492 L Готовая смесь с Q5® HF для ПЦР
Концентрация:2X    Кол-во:500 реакций  
N0446 S Набор дезоксинуклеотидов (дАТФ, дЦТФ, дГТФ и дТТФ)
Концентрация:100 мМ    Кол-во:25 мкмоль  
M0491 S Q5® HF ДНК-полимераза (100 е.а.)
Концентрация:2 000 е.а./мл    Кол-во:100 е.а.  

Указанные на сайте цены включают НДС. Цена указана со склада в Москве

1 2

Назад к странице «Наборы и реактивы для проведения амплификации и ПЦР»