Реактивы и оборудование
для лабораторий

Набор Phusion для HF ПЦР

Набор Phusion® для HF ПЦР содержит Phusion® HF ДНК-полимеразу, буфер, дезоксинуклеотидтрифосфаты, хлорид магния, ДМСО и маркер длин ДНК в количестве достаточном для постановки 50 (набор S) или 200 (набор L) полимеразных цепных реакций. Также в состав набора входит образец ДНК и праймеры для постановки 20-ти контрольных реакций.

Phusion® HF ДНК-полимераза представляет собой Pyrococcus-подобный фермент, слитый с доменом, усиливающим процессивность. Такая уникальная структура обеспечивает одновременно высокие точность и скорость реакции. Количество ошибок, которые делает данный фермент, снижено более чем в 50 раз по сравнению с Taq ДНК-полимеразой и в 6 раз по сравнению с ДНК-полимеразой Pyrococcus furiosus, что делает его одной из самых точных термостабильных полимераз. Фермент обладает 5'-->3' активностью и 3'-->5' экзонуклеазной активностью, а синтезируемые в ходе ПЦР продукты имеют тупые концы. Одна единица активности (е.а.) Phusion® HF ДНК-полимеразы определяется как количество фермента, необходимое для включения 10 нмоль дНТФ в кислотонерастворимую фракцию в течение 30 минут при температуре 74°C.

E0553.gif

Фрагмент ДНК длиной 3.8 т.п.н. амплифицировали при помощи нескольких полимераз. В качестве матрицы использовали 50 нг геномной ДНК клеток линии Jurkat. Реакции проводили согласно рекомендациям: над электрофореграммой указаны время элонгации в минутах и количество фермента в е.а. В качестве маркера использовали Маркер 1 т.п.н. длин ДНК.

Применение:

  • ПЦР,
  • удлинение праймеров,
  • клонирование,
  • длинная или сложная амплификация,
  • ПЦР с высоким выходом (High-Throughput PCR).

В состав набора входят:
Phusion® HF ДНК-полимераза, 2 000 е.а./мл,
Буфер для Phusion® HF ДНК-полимераз, 5Х,
Буфер GC для Phusion® HF ДНК-полимераз, 5Х,
Смесь дезоксинуклеотидтрифосфатов (дНТФ), 10 мМ,
ДМСО, 100%,
Раствор MgCl2, 50 мМ,
Контрольная ДНК бактериофага лямбда, 0,5 мкг/мл,
Смесь праймеров для контрольной реакции (фрагмент 1,3 т.п.н.), 4 мкМ,
Смесь праймеров для контрольной реакции (фрагмент 10 т.п.н.), 4 мкМ,
Маркер Quick-Load® длин ДНК, 100 мкг/мл.

Температура хранения: -20°С

Химический состав:

Phusion® HF ДНК-полимераза: высокоочищенный фермент, 20 мM трис-гидрохлорид, 100 мM KCl, 1 мM ДТТ, 0.1 мM ЭДТА, 200 мкг/мл БСА, 50% глицерин, pH 7.4 при 25°C.

Маркер Quick-Load® длин ДНК : раствор рестриктных фрагментов ДНК длиной 23130 н.п. (119 нг), 9416 н.п. (49 нг), 6557 н.п. (34 нг), 4361 н.п. (23 нг), 2322 н.п. (12 нг), 2027 н.п. (11 нг), 1353 н.п. (188 нг), 1078 н.п. (150 нг), 872 н.п. (122 нг), 603 н.п. (84 нг), 564 н.п. (3 нг), 310 н.п. (44 нг), 281 н.п. + 271 н.п. (77 нг), 234 н.п. (32 нг), 194 н.п. (27 нг), 125 н.п. + 118 н.п. (17 нг), 72 н.п. (10нг) в буфере, содержащем 2.5% Фиколл 400, 11 мМ ЭДТА, 3.3 мМ трис-гидрохлорид, 0.017% SDS, 0.015% бромфеноловый синий, pH 8.0 при 25°C.

Последовательность праймеров:

Смесь праймеров для контрольной реакции (фрагмент 1,3 т.п.н.):
Праймер 1 (27-мер): 5’ GTC ACC AGT GCA GTG CTT GAT AAC AGG 3’
Праймер 2 (28-мер): 5’ GAT GAC GCA TCC TCA CGA TAA TAT CCG G 3’

Смесь праймеров для контрольной реакции (фрагмент 10 т.п.н.):
Праймер 1 (22-мер): 5’ CAG TGC AGT GCT TGA TAA CAG G 3’
Праймер 2 (20-мер): 5’ GTA GTG CGC GTT TGA TTT CC 3 ‘

Примечания:
Концентрация MgCl2 в однократных растворах буферов составляет 1.5 мМ.

Онлайн-инструменты:

Tm Calculator

Артикул Название товара Цена
E0553 S Набор Phusion® для HF ПЦР
Концентрация:-    Кол-во:50 реакций  
5683 р.
E0553 L Набор Phusion® для HF ПЦР
Концентрация:-    Кол-во:200 реакций  
19846 р.

Указанные на сайте цены включают НДС. Цена указана со склада в Москве

Обычно с этим товаром покупают

Артикул Название товара Цена

Указанные на сайте цены включают НДС. Цена указана со склада в Москве

Назад к странице «Наборы и реактивы для проведения амплификации и ПЦР»