Реактивы и оборудование
для лабораторий

Bst 2.0 ДНК-полимераза

Одним из приоритетных направлений разработок компании New England Biolabs является вся линейка ферментов и расходных материалов для ПЦР. Чтобы помочь пользователям ферментов разобраться в многообразии ДНК-полимераз, мы подготовили обзоры, посвященные в том числе изотермальной амплификации и высокоточным ДНК-полимеразам. Отдельно была вынесена информация по ДНК-полимеразе Q5, которая на сегодняшний день является самой точной ДНК-полимеразой на рынке.

Артикул Название товара Цена
M0537 M Bst 2.0 ДНК-полимераза, высокой концентрации
Концентрация:120 000 е.а./мл    Кол-во:8 000 е.а.  
23857 р.
M0537 L Bst 2.0 ДНК-полимераза
Концентрация:8 000 е.а./мл    Кол-во:8 000 е.а.  
23857 р.

Указанные на сайте цены включают НДС. Цена указана со склада в Москве

Bst 2.0 ДНК-полимераза является разработанным in silico гомологом большого фрагмента ДНК-полимеразы I Bacillus stearothermophilus (Bst ДНК-полимераза, большой фрагмент). Этот фермент обладает 5’ -> 3’ ДНК-полимеразной активностью и хорошей способностью к замещению цепей ДНК, но не проявляет 5’ -> 3’ экзонуклеазной активности. Для Bst 2.0 ДНК-полимеразы характерны повышенная скорость амплификации, высокий выход продукта, повышенная толерантность к содержанию солей и большая термостабильность по сравнению с большим фрагментом Bst ДНК-полимеразы дикого типа.

Применение:

  • изотермическая амплификация ДНК,
  • синтез ДНК посредством замещения цепи,
  • секвенирование GC-богатых регионов ДНК,
  • быстрое секвенирование малых количеств (нг) ДНК.

Происхождение: штамм E.coli, экспрессирующий Bst 2.0 ДНК-полимеразу под контролем индуцибельного промотора.

Одна единица активности (е.а.): количество фермента, необходимое для включения 25 нмоль дНТФ в кислотонерастворимую фракцию в течение 30 минут при 74°С.

Условия реакции: 1х буфер для изотермической амплификации, инкубировать при 65°С.

В состав набора также входят:
Буфер для изотермической амплификации, 10X

Температура хранения: -20°C

Химический состав:

Фермент: высокоочищенный фермент, 10 мМ трис-гидрохлорид, 50 мМ KCl, 1 мМ ДТТ, 0.1 мМ ЭДТА, 50% глицерин, 0.1% Тритон Х-100, pH 8.8 при 25°C

Буфер (1X): 20 мМ трис-гидрохлорид, 10 мМ (NH4)2SO4, 50 мМ KCl, 2 мМ MgSO4, 0.1% Tween 20, pH 8.8 при 25°C

Тепловая инактивация: 80°С в течение 20 мин.

Буфер для разведения: NEB A

Примечания:

  1. Не рекомендуется проведение реакции при температуре выше 70°C из-за резкого снижения активности фермента.
  2. Не может быть использована при термоциклировании в ходе секвенирования и ПЦР, для достройки 3’-выступающих концов и отщепления 5’-выступающих концов ДНК.
  3. В качестве буфера для проведения реакции может использоваться ThermoPol буфер для термофильных полимераз, в котором фермент проявляет практически оптимальную активность. В NEB-буфере 1 фермент активен на 25%, в NEB-буферах 2, 3, 4 и EcoRI – на 100%. Для достижения наилучшего результата в NEB-буферы 1-4 должны быть добавлены Тритон X-100 (до 0.1%), Tween 20 (до 0.1%) или БСА (до 100 мкг/мл).
  4. Может инициировать синтез цепи в области ника, используя 3’OH в качестве праймера.
  5. Может использоваться в реакциях мечения и частичного заполнения ДНК.
  6. Может быть разведена и храниться в буфере, содержащем 0.1% Тритон Х-100 и 100 мкг/мл БСА. Оптимальным для хранения является буфер, содержащий 50 мМ KCl, 10 мМ трис-гидрохлорид (pH 7.5), 0.1 мМ ЭДТА, 1 мМ ДТТ, 0.1% Тритон Х-100, 50% глицерин.
  7. При температуре 37°C фермент активен на 10-15%, 50°C – на 30-50%, 60-70°C – на 100%, 72°C - на 30-50% .

Обычно с этим товаром покупают

Артикул Название товара Цена
B8001 S Буфер для разведения NEB A
Концентрация:1X    Кол-во:5 мл  
B1003 S Раствор сульфата магния (MgSO4)
Концентрация:100 мМ    Кол-во:6 мл  
N0447 S Смесь дезоксинуклеотидов (дАТФ, дЦТФ, дГТФ и дТТФ) (8 мкмоль)
Концентрация:10 мМ    Кол-во:8 мкмоль  
N0447 L Смесь дезоксинуклеотидов (дАТФ, дЦТФ, дГТФ и дТТФ)
Концентрация:10 мМ    Кол-во:40 мкмоль  
N0446 S Набор дезоксинуклеотидов (дАТФ, дЦТФ, дГТФ и дТТФ)
Концентрация:100 мМ    Кол-во:25 мкмоль  

Указанные на сайте цены включают НДС. Цена указана со склада в Москве

Назад к странице «ДНК-полимеразы»